Kodi mungadziwe bwanji kuchuluka kwabwino kwambiri?
Kwa inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), kuchuluka kwa shuga m'magazi kukakhala kwakukulu, kumakhala bwino. Kuchuluka kwa shuga m'magazi kumadalira momwe zinthu zilili komanso momwe munthu angapangire kuti shuga alowe m'magazi.
Kawirikawiri, kuchuluka kwa IPTG kumagwiritsidwa ntchito pakati pa 0.1-1 mM. Kuchuluka kochepa kumatha kuchepetsa zotsatirapo zoyipa pa kukula kwa maselo ndipo kungachepetse poizoni wa maselo chifukwa cha kuchuluka kwa mapuloteni omwe amafunidwa. Kuchuluka kwambiri kungayambitse vuto lalikulu la kagayidwe ka maselo, zomwe zimakhudza kukula kwa maselo ndi magwiridwe antchito a maselo.
Njira yodziwira kuchuluka kwabwino kwambiri ingakhale kuyesa kuchuluka kwa mapuloteni omwe akufunidwa mwa kuchita mayeso oyambitsa IPTG pamlingo wosiyanasiyana. Mayeso ang'onoang'ono okulitsa akhoza kuchitidwa pogwiritsa ntchito mitundu yosiyanasiyana ya IPTG (monga 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ndi zina zotero) ndipo zotsatira za kuchuluka kwa mapuloteni pamlingo wosiyanasiyana zitha kuyesedwa pozindikira kuchuluka kwa mapuloteni omwe akufunidwa (monga Western blot kapena fluorescence detection). Malinga ndi zotsatira za kafukufuku, kuchuluka kwa mapuloteni omwe ali ndi mphamvu yabwino kwambiri yowonetsera kwasankhidwa ngati kuchuluka kwabwino kwambiri.
Kuphatikiza apo, muthanso kuwona mabuku oyenera kapena zomwe zachitika m'ma laboratories ena kuti mumvetsetse kuchuluka kwa IPTG komwe kumagwiritsidwa ntchito kwambiri pansi pa mikhalidwe yofanana yoyesera, kenako ndikukonza ndikusintha malinga ndi zosowa zoyesera.
Ndikofunikira kudziwa kuti kuchuluka kwabwino kwambiri kumatha kusiyana malinga ndi machitidwe osiyanasiyana owonetsera, mapuloteni ofunikira, ndi mikhalidwe yoyesera, kotero ndibwino kukonza bwino nthawi ndi nthawi.
Nthawi yotumizira: Sep-28-2023